تجهیز آزمایشگاه مولکولی

راه اندازی و تجهیز آزمایشگاه مولکولی، یکی از دغدغه های صاحبان آزمایشگاهان است که در این مقاله سعی می کنیم تا شمارا با این عمل آشنا کنیم و در صورت نیاز بتوانید درخواست تجهیز آزمایشگاه مولکولی را بدهید.

امروزه حجم وسیعی از اطلاعات ژنتیکی موجود و اهمیت آن ها در سلامت، دیدگاه عمومی را در مورد رابطه بین علم ژنتیک و سلامت افزایش می دهد، که منجر به افزایش تقاضا برای انجام آزمایش های ژنتیکی شده است. لذا جهت رفع نیاز بیماران و تسهیل انجام تست های ژنتیکی و مولکولی، نیاز به تجهیز و راه اندازی آزمایشگاه های مولکولی در حال افزایش می باشد.

 اهمیت استانداردسازی به دلیل توانایی آن در به حداقل رساندن عدم قطعیت از مرحله پیش تحلیلی تا تهیه گزارش های نهایی است. بنابراین، کیفیت نتایج آزمایشگاهی باید با افزایش درخواست‌های پزشک و بیمار و رضایت آنها افزایش یابد.اشتباهات آزمایشگاهی در سراسر جهان گزارش شده است و گاهی اوقات می تواند باعث آسیب دائمی یا حتی مرگ بیماران شود.

نرخ رشد ارزش آزمایشگاه ها و تجهیزات مولکولی:

• گزارشی درباره بازار تجهیزات آزمایشگاهی تشخیص مولکولیکه می گوید که این بازار در سال 2020 میلیارد 8.3 دلار ارزش داشته و پیش بینی می شود تا سال 2027 با نرخ رشد سالانه ترکیبی 13.2 درصد به میلیارد 18.3 دلار برسد.
• این گزارش می گوید که عواملی مانند افزایش تقاضا برای تشخیص سریع و دقیق بیماری های عفونی، پیشرفت های فناوری در تجهیزات تشخیص مولکولی، افزایش تحقیقات و توسعه در زمینه تشخیص مولکولی و افزایش حمایت های دولتی و سرمایه گذاری های خصوصی برای این بازار موثر هستند.
• این گزارش همچنین می گوید که چه نوع تجهیزاتی مانند ترمال سایکلر، اسپکتروفتومتر، سانتریفیوژ، الکتروفورز، اتوکلاو و غیره در این بازار موجود هستند و چه بخش هایی مانند بیمارستان ها، آزمایشگاه ها، مراکز تحقیقاتی و غیره از این تجهیزات استفاده می کنند.

مجوزها و الزامات:

تأسیس و راه اندازی یک آزمایشگاه مولکولی شامل رعایت استانداردهای ملی یا بین المللی مختلفی است که بسته به کشور و فعالیت‌های خاصی که قصد انجام آنها را دارید، متفاوت می باشد. در اینجا برخی از انواع کلی مجوزها و اجازه‌نامه‌هایی که ممکن است مورد نیاز باشد، آورده شده‌اند:

رعایت استانداردهای CLIA  و ISO 15189:

برای انجام آزمایش های مربوط به تشخیص بیماری ها یا درمان های ژنتیکی، نیاز به رعایت استانداردهای CLIA (گواهینامه بهبود آزمایشگاه‌های بالینی) یا ISO 15189 داشته باشید. برای انجام آزمایش های مربوط به تحقیقات علمی یا توسعه فناوری، ممکن است نیاز به رعایت استانداردهای GLP یا ISO 17025 داشته باشید. برای رعایت این استانداردها، ممکن است نیاز به ارزیابی دوره ای یا اعتبارسنجی آزمایشگاهی داشته باشید.

گواهینامه‌های بهداشت و ایمنی:

از آنجایی که یک آزمایشگاه مولکولی با مواد و روش‌های بالقوه خطرناک سروکار دارد، رعایت مقررات بهداشت و ایمنی ضروری است. این ممکن است شامل دریافت گواهینامه‌هایی باشد که نشان می‌دهد آزمایشگاه شما استانداردهای ایمنی معینی را برآورده می‌کند.

مجوز استفاده از مواد زیستی:

اگر آزمایشگاه شما با عوامل عفونی، ارگانیسم‌های ژنتیکی تغییر یافته یا سایر مواد بیوهازارد کار کند، ممکن است به مجوز استفاده از مواد زیستی (BUA) یا مجوز مشابهی از مقامات بهداشتی یا بیوسیفتی مربوطه نیاز داشته باشید.

اعتبارسنجی‌ها:

در حالی که همیشه اجباری نیست، کسب اعتبارسنجی‌ها از سازمان‌های حرفه‌ای مربوطه (مانند کالج پاتولوژیست‌های آمریکایی برای آزمایشگاه‌های پزشکی در آمریکا) برای اعتبار و تضمین کیفیت مفید است.

استخدام پرسنل متخصص:

برای تأسیس و حفظ آزمایشگاه مولکولی، لازم است از پرسنل متخصص و مجرب برای انجام آزمایش ها یا مدیریت آزمایشگاه استفاده کنید. برای مثال، برای انجام آزمایش های مربوط به توالی یابی DNA یا RNA، نیاز به داشتن پرسنلی با تحصیلات و تجربه در زمینه های مولکولی یا بیوانفورماتیک داشته باشید. برای انجام آزمایش های مربوط به PCR یا qPCR، نیاز به داشتن پرسنلی با تحصیلات و تجربه در زمینه های ژنتیک یا میکروبیولوژی داشته باشید. برای مدیریت آزمایشگاه، نیاز به داشتن پرسنلی با تحصیلات و تجربه در زمینه های مدیریت کیفیت یا ایمنی آزمایشگاهی داشته باشید.

فضاسازی

برای جداسازی فضا و روند کار یکطرفه، ممکن است لازم باشد از درب های خودبسته یا فشار منفی برای جلوگیری از انتشار آلودگی به اتاق های دیگر استفاده کنید. برای مثال، برای اتاق استخراج، ممکن است نیاز به داشتن یک درب اتومات باشد که در هنگام ورود و خروج پرسنل به طور خودکار بسته شود. برای اتاق Cleanroom، ممکن است نیاز به داشتن یک درب فشار منفی باشد که باعث شود هوای تمیز از اتاق خارج نشود و هوای آلوده از اتاق های دیگر وارد نشود.

طراحی و فضا سازی یک آزمایشگاه مولکولی نیازمند برنامه‌ریزی دقیق است تا ایمنی، کارآمدی و رعایت استانداردهای قانونی تضمین شود. در اینجا به موارد کلیدی برای فضاگذاری و سازماندهی یک آزمایشگاه مولکولی اشاره می‌کنیم:

چیدمان تجهیزات:

تجهیزات را به گونه‌ای قرار دهید که از آلودگی جلوگیری شود و دسترسی آسان فراهم شود. به عنوان مثال، دستگاه‌های PCR باید از مناطقی که نمونه‌ها آماده می‌شوند دور باشند.

work station:

فضای کافی برای هر  work station را با در نظر گرفتن ارگونومی و راحتی پرسنل آزمایشگاه تضمین کنید. هر work station باید به راحتی به تجهیزات لازم و امکانات ایمنی دسترسی داشته باشد.

فضاهای تمیز و کثیف:

فضاهای تمیز را برای آماده‌سازی نمونه و تحلیل و فضاهای کثیف را برای دفع زباله و تمیز کردن تجهیزات استفاده شده تعیین کنید.

فضا برای مستندسازی:

فضایی برای ثبت و نگهداری دفترچه‌های آزمایشگاهی، پروتکل‌ها و داده‌های الکترونیکی در نظر بگیرید، ترجیحاً دور از مناطق پرخطر.

علائم و برچسب‌گذاری:

علائم مناسب برای تجهیزات ایمنی، مواد خطرناک و رویه‌های اضطراری ضروری است. مناطق نگهداری، تجهیزات و مناطق کاری را به وضوح برچسب‌گذاری کنید.

انتخاب دستگاه های مولکولی مناسب

انتخاب دستگاه‌های مولکولی مناسب برای تجهیز یک آزمایشگاه مولکولی نیازمند در نظر گرفتن عوامل مختلفی است تا اطمینان حاصل شود که تجهیزات با نیازهای خاص تحقیقاتی و آزمایشی آزمایشگاه شما مطابقت دارند. در اینجا به جنبه‌های کلیدی اشاره شده است:

 مشخصات فنی دستگاه pcr و دستگاه ریل تایم pcr که هنگام خرید باید به آن ها توجه ویژه داشته باشید :

ظرفیت و حجم: نیازهای ظرفیت و حجم نمونه ها را در نظر بگیرید. دستگاه‌های با ظرفیت بالاتر گران‌تر هستند اما برای آزمایشگاه‌های بزرگتر کارآمد هستند.

دقت و حساسیت: اطمینان حاصل کنید که تجهیزات، دقت و حساسیت بالایی دارند، به ویژه برای کمی‌سازی در تکنیک ریل تایم و توالی‌یابی.

نرم‌افزار و تجزیه و تحلیل داده‌ها: بررسی کنید که آیا نرم‌افزار ارائه شده با دستگاه کاربرپسند است و نیازهای تجزیه و تحلیل داده‌های شما را برآورده می‌کند.

معرفی بهترین و کارا ترین دستگاه ترمو سایکلر PCR :

دستگاه Veriti (وریتی):

این دستگاه با دقت بالا و دارای قابلیت سرعت استاندارد و سریع ، قیمت مناسب و  کاربری بسیار آسان، نیازهای شما را کاملا براورده می کند. صفحه نمایش لمسی 6.5 اینچی می باشد، دارای ظرفیت های 60-96-384 چاهکه و دارای گرادیانت است و دستگاه  مدل 96 ظرفیته شامل شش بلوک دمایی مستقل می باشد.

معرفی بهترین و کارا ترین دستگاه های ریل تایم PCR:

• دستگاه Rotor gene |روتورجین

از جمله کارآمد ترین و قابل اعتماد ترین دستگاه ها در زمینه ی ریل تایم به شمار می آید. این دستگاه دارای 5 فیلتر رنگی بوده و سیستم کالیبراسیون دستگاه به صورت اتوماتیک می باشد و نیازی به استفاده از رنگ ROX  در خوانش ندارد. همچنین نیاز به کالیبراسیون های کوتاه مدت در آن وجود ندارد. دارای 3 روتور 36-72-100 برای اجرای نمونه ها در حجم ها و تعداد متنوع می باشد.

• دستگاه step one plus:

دارای سرعت و دقت بالا با  4 کانال نوری می باشد. این دستگاه دارای 6 زون برای مدل پلاس است که توانایی انجام سریع ریکشن ها را در کمتر از 40 دقیقه دارا می باشد. از مشخصات مشترک این دستگاه ها صفحه نمایش بزرگ لمسی و دارا بودن لامپ های LED با طول عمر طولانی برای طیف رنگیROX, VIC/JOE, FAM/SYBR Green I می باشد. این دستگاه دارای توانایی انجام آنالیز high-resolution melt  می باشد.

بیشتر بخوانید:کاربرد تکنیک FISH در انکولوژی

لطفا برای تکمیل این فرم، جاوا اسکریپت را در مرورگر خود فعال کنید.

نام و نام خانوادگی شما *

شماره تماس شما *

ارسال

دستگاه های اندازه گیری کمی پروتئین، RNA و  DNA

• دستگاه نانودراپ:

دستگاه نانودراپ یک دستگاه اسپکتروفتومتری است که برای تعیین غلظت و خلوص اسیدهای نوکلئیک، پروتئینها و مواد دیگر در محلولهای بیولوژیکی استفاده میشود. این دستگاه دارای ویژگی های زیر است:

• نیاز به حجم بسیار کمی از نمونه (حدود ۱ تا ۲ میکرولیتر) برای انجام آزمایش دارد.
• قابلیت اندازه گیری جذب نوری در محدوده فرابنفش و مرئی (۲۰۰ تا ۸۵۰ نانومتر) را دارد.
• قابلیت اتصال به کامپیوتر و نرم افزارهای مرتبط را دارد و میتواند نتایج را به صورت خودکار محاسبه و نمایش دهد.
• قابلیت انجام تست های الایزا و طبقه بندی زیرگروه ها
• قابلیت انجام آزمایش های مختلف مانند تعیین غلظت DNA، RNA، پروتئین، کاروتنوئید، کلروفیل و غیره را دارد.

• دستگاه Qubit :

دستگاه qubit یک دستگاه فلورومتری است که شرکت تولیدی ترموفیشر می باشد و سال تولید این دستگاه 2017 است، برای تعیین غلظت و خلوص اسیدهای نوکلئیک، پروتئینها و مواد دیگر در محلولهای بیولوژیکی استفاده میشود. این دستگاه دارای ویژگی های زیر است:

• نیاز به حجم بسیار کمی از نمونه (حدود ۱ تا ۲ میکرولیتر) برای انجام آزمایش دارد.
• قابلیت اندازه گیری فلورسانس در محدوده طول موج ۴۶۰ تا ۶۶۰ نانومتر را دارد.
• قابلیت اتصال به کامپیوتر و نرم افزارهای مرتبط را دارد و میتواند نتایج را به صورت خودکار محاسبه و نمایش دهد.
• قابلیت انجام آزمایش های مختلف مانند تعیین غلظت DNA، RNA، miRNA، پروتئین، میکروب ها و غیره را دارد.

معرفی بهترین و کارا ترین دستگاه های سکانس:

• Sanger:

تکنیک Sanger یک روش توالی یابی DNA است که بر اساس خاتمه زنجیره با استفاده از دی دئوکسی نوکلئوتیدها کار میکند. این روش به عنوان پایه ای برای تکنیک های توالی یابی نسل جدید (Next generation sequencing) شناخته میشود که با سرعت و دقت بالاتر قادر به توالی یابی ژنوم های بزرگتر هستند.

برای انجام تکنیک Sanger، نیاز به دستگاههای خاصی است که میتوانند واکنش PCR را انجام دهند و سیگنالهای فلورسانس را اندازه گیری کنند. این دستگاهها به طور کلی به عنوان طیف سنج های DNA (DNA sequencers) شناخته میشوند و از تکنولوژی های مختلفی مانند الکتروفورز کاپیلاری، میکروچیپ های الکترونیکی، میکروآرایه های نوری و غیره استفاده میکنند. برخی از مهمترین دستگاه هایی که برای تکنیک Sanger مورد استفاده قرار میگیرند، عبارتند از:

• دستگاه ABI 3130 Genetic Analyzer:

• یک سیستم تجزیه و تحلیل DNA مبتنی بر فلورسانس با 4 کپیلار است که به طور موازی عمل می‌کند. این دستگاه امکان تولید داده‌های با کیفیت بالا و پردازش نمونه‌ها را برای آزمایشگاه‌های تحقیقاتی فراهم می‌کند. ABI 3130 از یک آرایه با 4 کپیلار برای پردازش نمونه‌ها در بلاک‌های 96 یا 384 چاهکی بهره می برد.

• دستگاه سکانس Genetic Analyzer 350:

• یک دستگاه توالی یابی DNA است که از تکنولوژی الکتروفورز کاپیلاری برای جداسازی و شناسایی قطعات DNA استفاده میکند. این دستگاه میتواند همزمان ۸یا ۲۴ نمونه را با سرعت و دقت بالا توالی یابی کند. این دستگاه برای انجام تست های ژنتیکی، تشخیص بیماری های ژنتیکی و غیره کاربرد دارد. این دستگاه از نرم افزار Data Collection v1.0 برای کنترل و اندازه گیری سیگنالهای فلورسانس استفاده میکند.
• 3500 Genetic Analyzer در دو پیکربندی موجود است: 3500 (8-کاپیلاری) و 3500xL (24-کاپیلاری)، که به آزمایشگاه‌ها امکان انتخاب بر اساس نیازهای خود را می‌دهد.

دستگاه سکانس ABI 3500 به دلیل دقت بالا و قابلیت‌های اتوماتیکی که ارائه می‌دهد، در زمینه‌های تحقیقات علمی و تشخیص بیماری‌ها از اهمیت بسیاری برخوردار است. اگر نیاز به انجام آنالیزهای سیکوئنسینگ DNA با دقت بالا و توانمندی اتوماسیون دارید، دستگاه ABI 3500 یکی از انتخاب‌های مناسب می‌باشد.

• NGS:

تکنیک NGS یا توالی یابی نسل جدید یک روش پیشرفته برای تعیین توالی DNA یا RNA است که میتواند میلیونها قطعه از مولکول های ژنتیکی را به صورت همزمان و سریع خوانده و رمزگشایی کند. این روش برای مطالعه ژنومیک، ترانسکریپتومیک، اپی ژنتیک، متابولومیک و غیره کاربرد دارد و میتواند اطلاعات مفیدی در مورد ساختار، عملکرد و تنوع ژنها، جهش ها، بیان ژن ها، تنظیم ژن ها و غیره ارائه دهد. این روش برای تشخیص و درمان بیماری های ژنتیکی، سرطان، عفونت ها و غیره نیز مفید است.

برای انجام تکنیک NGS، نیاز به دستگاه های خاصی است که میتوانند واکنش های توالی یابی را انجام دهند و سیگنال های فلورسانس را اندازه گیری کنند. این دستگاهها به طور کلی به عنوان توالی یاب های NGS شناخته میشوند و از تکنولوژی های مختلفی مانند الکتروفورز کاپیلاری، میکروچیپ های الکترونیکی، میکروارایه های نوری و غیره استفاده میکنند. برخی از مهمترین دستگاه هایی که برای تکنیک NGS مورد استفاده قرار میگیرند، عبارتند از:

• دستگاه Illumina MiSeq که از تکنولوژی سنتز متوالی(sequencing by synthesis)  برای توالی یابی DNA یا RNA استفاده میکند و میتواند تا ۲۵ میلیون قطعه DNA را در هر واکنش توالی یابی کند.
• Ion Torrent PGM:
• که یک دستگاه توالی یابی DNA است که از تکنولوژی توالی یابی پروتونی proton sequencing) ) برای تعیین توالی DNA یا RNA استفاده میکند. این دستگاه با استفاده از یک چیپ نیمه هادی، تغییرات pH را که در طی واکنش PCR ایجاد میشوند، اندازه گیری میکند و به عنوان سیگنال دیجیتال ثبت میکند. این دستگاه میتواند تا ۵ میلیون قطعه DNA را در هر واکنش توالی یابی کند و برای مطالعه ژنومیک، ترانسکریپتومیک، اپی ژنتیک و غیره کاربرد دارد.

یکی از تفاوت های شاخص این دو دستگاه:

هزینه و سرعت توالی یابی:

دستگاه Ion Torrent PGM دارای هزینه و سرعت توالی یابی پایین تری نسبت به دستگاه Illumina MiSeq است. برای مثال، برای توالی یابی یک ژنوم باکتریایی با اندازه ۵ مگاباز، دستگاه Ion Torrent PGM نیاز به ۲ ساعت و ۱۰۰ دلار دارد، در حالی که دستگاه Illumina MiSeq نیاز به ۱۵ ساعت و ۲۰۰ دلار دارد. جهت دریافت مشاوره و سفارش دستگاه های توالی یابی با کارشناسان ما در ماناتک در تماس باشید.

خرید تجهیزات آزمایشگاهی

انتخاب و خرید تجهیزات آزمایشگاهی مانند میکروسکوپ فلورسنت، میکروسکوپ معکوس، انواع هود و انکوباتور CO2 نیازمند توجه دقیق به چندین عامل دراد. هر یک از این ابزارها کاربرد متفاوتی دارند و انتخاب آن‌ها بستگی به نیازهای خاص کار تحقیقاتی یا آزمایشگاهی شما دارد. در اینجا راهنمایی برای کمک به تصمیم‌گیری‌های آگاهانه ارائه شده است:

میکروسکوپ فلورسنت:

• کاربرد: کاربردهای خاصی که برای میکروسکوپ فلورسنت نیاز دارید را مشخص کنید. این موضوع بر نوع فیلترها، منبع نور و سایر ویژگی‌هایی که ممکن است به آن‌ها نیاز داشته باشید تأثیر می‌گذارد.
• فیلترها و منبع نوری: انواع فیلترها و منابع نور )مانندLED ، هالوژن یا لامپ‌های جیوه( را بررسی کنید و مطمئن شوید که برای رنگدانه‌های فلورسنت یا پروتئین‌های شما مناسب هستند.
• بودجه: میکروسکوپ‌های فلورسنت می‌توانند گران باشند، بنابراین گزینه‌های خود را با بودجه خود هماهنگ کنید.

میکروسکوپ invert یا معکوس:

• کاربرد: میکروسکوپ‌های معکوس برای مشاهده سلول‌ها یا موجودات در قعر ظرفی (مانند پتری دیش یا فلاسک) استفاده می‌شوند. مطمئن شوید که این با نیازهای شما همخوانی دارد.
• کنتراست فازی و: DIC اگر نیاز به مشاهده سلول‌های زنده یا نمونه‌ها بدون رنگ‌آمیزی دارید، قابلیت‌های کنتراست فازی یا تداخل (DIC)  را در نظر بگیرید.
• اندازه و ارگونومی: مطمئن شوید که میکروسکوپ با فضای آزمایشگاه شما هماهنگ است و برای استفاده مکرر طراحی ارگونومیک دارد.

هود (هود لامینار/کابینت ایمنی بیولوژیک):

• نوع: بین هود لامینار و کابینت ایمنی بیولوژیک، بسته به اینکه آیا نیاز به حفاظت از نمونه، کاربر یا هر دو دارید، انتخاب کنید.
• فیلترهای: HEPA مطمئن شوید که هود دارای فیلترهای HEPA برای جذب ذرات و آلاینده‌ها است.
• اندازه و ظرفیت: اندازه هود و فضای کاری مورد نیاز خود را در نظر بگیرید.
• استانداردهای ایمنی: بررسی کنید که هود تمام استانداردهای ایمنی و گواهینامه‌های لازم را دارا باشد.

انکوباتور CO2:

• ظرفیت: ظرفیت مورد نیاز خود را بر اساس حجم محیط کشت و نمونه هایی که قصد رشد و تکثیر دارید، تعیین کنید.
• کنترل دما و: CO2 کنترل دقیق بر دما و سطح CO2 را تضمین کنید.
• کنترل رطوبت: برخی از کشت‌های سلولی نیاز به کنترل رطوبت برای رشد بهینه دارند.
• استریلیزاسیون: به دنبال ویژگی‌هایی مانند استریلیزاسیون UV برای حفظ محیط استریل باشید.
• تمیزی آسان: مطمئن شوید که انکوباتور به راحتی تمیز و نگهداری می‌شود.

 موارد پشتیبانی و خرید دستگاه:

ملاحظات بودجه: هزینه تجهیزات را با ویژگی‌های ارائه شده متعادل کنید. گاهی اوقات، مدل‌های مقرون به صرفه‌تر می‌توانند نیازهای شما را به خوبی برآورده کنند.

فضا و زیرساخت: اطمینان حاصل کنید که آزمایشگاه شما فضای لازم و زیرساخت‌هایی مانند تأمین برق و کنترل دما را برای استقرار این دستگاه‌ها دارد.

گارانتی و خدمات: گارانتی و دسترسی به خدمات و پشتیبانی را بررسی کنید.

شهرت برند و ارزیابی فروشنده: به دنبال شهرت برند و همچنین تولیدکنندگان و تامین‌کنندگان مختلف را بررسی کنید. به دنبال کسانی باشید که از نظر اعتبار شناخته شده‌اند.

نظرات کاربران و بازخورد: به دنبال نظرات کاربران باشید یا از آزمایشگاه‌های دیگر توصیه‌هایی بخواهید.

پشتیبانی پس از فروش: از پشتیبانی خوب پس از فروش برای تعمیر و نگهداری و عیب یابی اطمینان حاصل کنید.

کلام آخر:

تصمیم‌گیری آگاهانه برای انتخاب تجهیزات و دستگاه های مولکولی شامل توازن بین عواملی که ذکر شد می باشد، البته بهترین تطابق را باید با نیازهای فعلی و آینده آزمایشگاه شما داشته باشد. همچنین شرکت در نمایشگاه‌های تجاری، وبینارها و کارگاه‌ها برای به‌روز ماندن از آخرین پیشرفت‌های تجهیزات آزمایشگاهی مولکولی نیز مفید است.

به یاد داشته باشید، مشورت با همکاران با تجربه یا نمایندگان فروش که می توانند بر اساس نیازهای خاص شما بینش بیشتری ارائه دهند، اغلب مفید است. شرکت ماناتک، با انجام خدمات و مشاوره تخصصی در زمینه راه اندازی و تجهیز 100-0 آزمایشگاه مولکولی و فروش و پشتیبانی انواع دستگاه های مولکولی در خدمت شما می باشد.

لطفا برای تکمیل این فرم، جاوا اسکریپت را در مرورگر خود فعال کنید. نام و نام خانوادگی شما * شماره تماس شما * ارسال