آیا از هر نوع مستر میکسی می توانیم استفاده کنیم؟ در قدم اول باید بدانیم مسترمیکس چیست و در چه تکنیکی استفاده می شود.

همان طور که از اسم مسترمیکس PCR (نام های دیگر : Super Mix، Ready Mix) مشخص است مخلوطی از چند محلول، معرف و آنزیم است. اما شاید بارها برای انتخاب محصول مصرفی از شرکت های مختلف دچار شک شده ایم، آیا مسترمیکسی که گران است بهتر است؟ آیا می شود مستر ارزان قیمت انتخاب کرد؟ آیا باید حتما از برندهای معتبر استفاده کنیم یا می شود به برندهای ایرانی نیز اعتماد کرد؟

یک مستر میکس خوب راه اندازی سریعتر را با پیپت کردن کمتر امکان پذیر می کند زیرا می توان مخلوط را در یک زمان آماده کرد و برای صرفه جویی در زمان بین چندین نمونه تقسیم کرد. محققان نیازی به صرف زمان جداگانه برای افزودن مقادیر دقیق بافر، آنزیم، dNTP، کوفاکتور و آب به هر لوله واکنش یا چاه صفحه ندارند. ترکیب اصلی دامنه پیپت کردن را کاهش می دهد، که به معنای فضای کمتر برای خطای آزمایشی، تنوع کمتر در بین لوله ها و حداقل آلودگی است.

مسترمیکس در چه تکنیکی استفاده می شود؟

PCR یا تکثیر ژنی زنجیره‌ای یک روش آزمایشگاهی است که با استفاده از آن می‌توان تعداد کپی‌های یک قطعه DNA را به صورت قابل توجهی افزایش داد. در این روش، DNA مورد نظر با استفاده از حرارت دادن و سرد شدن به صورت مکرر، تکثیر می‌شود. برای انجام PCR، نیاز به مستر میکس، DNA نمونه مدنظر، پرایمر و آب داریم.

یک مسترمیکس خوب باید دارای یکسری ویژگی باشد که در این مقاله به آن اشاره می کنیم.

این مخلوط حاوی dNTPs، آنزیم های taq DNA پلیمراز، mgcl2، تثبیت کننده ها و تقویت کننده ها باشد لازم است از مواد DNA free و RNA free برای جلوگیری از آلودگی استفاده شده باشد.

برای مثال ترکیبات میتواند این چنین باشد:

بیشتر بخوانید:الگوهای جهش ناشی از قرار گرفتن در معرض تابش

Volume(µl)	PCR mixer components
2.5	10x Buffer
0.5	Forward Primer
0.5	Reverse Primer
0.25	Taq DNA Polymerase
0.75	Mgcl2
19	H2O
1	DNA template
25	Total volume

اگر مسترمیکس را به صورت پودری تهیه کنیم میزان ماندگاری بشدت بالاتری دارد اما در صورت پرداخت هزینه باید هزینه ای مضاعف متقبل بشوید.
سازگاری بالا برای استفاده انواع دستگاه ها را داشته باشد.
پایدار باشد و بتوانیم با وجود تکرار تست از آن استفاده کنیم (مقرون به صرفه بودن).
از قبل مخلوط مواد انجام شده باشد و دارای رنگ (آبی، قرمز و ..) باشد چون ساخت آن و اضافه کردن رنگ می تواند زمان انجام فرآیند را طولانی تر کند.
بتوانیم مستر میکس را به طور مستقیم روی ژل آگارزو SDS بارگذاری کنیم.
بهتر است از مستر میکسی استفاده کنیم که بتوان آن را در محیط اتاق نگه داشت.

شرایط نگهداری: به شرایط نگهداری توصیه شده برای مسترمیکس توجه کنید. برخی از مسترمیکس ممکن است نیاز به ذخیره‌سازی منجمد داشته باشند، در حالی که برخی دیگر را می‌توان در دمای اتاق نگهداری کرد. قبل از خرید مطمئن شوید که می توانید محصول را به درستی ذخیره کنید.

کاربرد را در نظر بگیرید: کاربردهای مختلف PCR، مانند qPCR یا RT-PCR، ممکن است به مسترمیکس های مختلفی نیاز داشته باشند. مطمئن شوید که ترکیب اصلی انتخابی شما برای برنامه خاص شما مناسب است. در نهایت بتوانیم بازده محصول بالایی داشته باشیم.

رنج قیمت به طور میانگین می تواند از 1 تا 12 دلار در نظرگرفته شود. (با توجه به نوسانات ارزی)
بهتر است هر 6 ماه تا یکسال محصول را مورد بررسی و تست قرار بدید تا از سالم بودن آن مطمئن شوید.

پیشنهاد : می تواند برای جلوگیری از آلوده یا خراب شدن محصولتان، آن را به چندین قسمت تقسیم کنید و برای هر بار استفاده یک استوک را استفاده نمائید. (در شرایط کاملا استریل)

کلام آخر

با توجه به نکات گفته شده در مقاله بالا می توانید تصمیم بگیرید چه نوع مسترمیکس و با چه قیمتی مناسب کار شما می باشد. برای دریافت مشاوره و خرید انواع دستگاه ترمال سایکلر pcr و انواع مسترمیکس ها می توانید با کارشناسان ما در ماناتک تماس حاصل فرمایید.