برای انجام تست دستگاه پی سی آر (PCR)، نیاز به یک برنامه دمایی منظم و دقیق است. این برنامه دمایی برای انجام مراحل مختلف تست PCR، از جمله دمای نمونهگیری، تخلیه، توالیگیری و تکثیر DNA استفاده میشود. در زیر، یک برنامه دمایی معمول برای تست PCR آمده است:
1. قدم اول: پیشگرما (Preheating)
– دمای اولیه: 95 درجه سانتیگراد
– زمان: 5 دقیقه
2. قدم دوم: سیکلهای تکثیر (Amplification Cycles)
– سیکل 1:
– دما: 95 درجه سانتیگراد
– زمان: 30 ثانیه
– سیکل 2:
– دما: دمای آنئالینگ (Annealing Temperature)
– زمان: 30 ثانیه
– سیکل 3:
– دما: 72 درجه سانتیگراد (دمای توالیگیری)
– زمان: 30 ثانیه
– تعداد سیکلها: تعداد مورد نیاز برای تکثیر DNA مورد نظر
3. قدم سوم: پسگرما (Final Extension)
– دما: 72 درجه سانتیگراد
– زمان: 5 دقیقه
این برنامه دمایی معمولاً برای تست دستگاه PCR استفاده میشود، اما ممکن است در برنامههای مختلف و با توجه به نوع تست و تجهیزات مورد استفاده، دماها و زمانها متفاوت باشند. بنابراین، بهتر است همیشه دستورالعمل تولیدکننده تجهیزات و کیت PCR را دنبال کنید و برنامه دمایی مورد نیاز را بر اساس آن تنظیم کنید.