ستونهای استخراج (Spin Columns)
ستونهای استخراج چند لایه برای خالصسازی اسیدهای نوکلئیک طراحی شدهاند و به دلیل ساختار چند لایهای خود، کارایی بالایی در جداسازی و خالصسازی دارند. این ستونها از مواد جاذب مانند سیلیکا تشکیل شدهاند که به صورت لایه های متعدد درون ستون قرار دارند. هر لایه به جذب و جداسازی اسیدهای نوکلئیک کمک میکند، و با افزایش تعداد لایه ها، کارایی جذب و خلوص نهایی افزایش مییابد.
این ستونها معمولاً شامل چندین بخش اصلی هستند:
• مواد پرکننده: مواد پرکننده مانند سیلیکا، که میتوانند به صورت دانه های ریز یا میکروکریست ها باشند، درون ستون قرار دارند و به جذب اسیدهای نوکلئیک کمک میکنند.
• فیلترها: فیلترها در بالا و پایین ستون قرار دارند تا مطمئن شوند که فقط اسیدهای نوکلئیک خالص از ستون عبور میکنند و ناخالصی ها حذف میشوند.
• بافرهای شستشو و الوشن: بافرهای مختلفی برای شستشوی ناخالصی ها و الوشن اسیدهای نوکلئیک استفاده میشوند. این بافرها به تنظیم pH و شرایط شیمیایی کمک میکنند تا اسیدهای نوکلئیک به درستی جذب و سپس رها شوند.
• ستونهای چرخان: برخی از ستونها قابلیت چرخش دارند تا فرآیند شستشو و الوشن را تسهیل کنند.
استفاده از ستونهای استخراج چند لایه به این صورت است که نمونه حاوی اسید نوکلئیک به ستون اضافه شده و پس از چندین مرحله شستشو و الوشن، اسید نوکلئیک خالص از ستون جدا میشود. این فرآیند به دلیل دقت و خلوص بالایی که فراهم میکند، در آزمایشگاههای مولکولی بسیار مورد استفاده قرار میگیرد و امکان تحقیقات دقیقتر و سریعتر را فراهم می آورد.
مراحل تخلیص بر مبنای ستون ها
تخلیص اسید نوکلئیک مبتنی بر ستون چرخشی به عنوان یک روش استخراج فاز جامد برای خالصسازی سریع اسیدهای نوکلئیک تعریف میشود. این فرآیند به این واقعیت بستگی دارد که اسیدهای نوکلئیک در شرایط خاص تمایل به اتصال به فاز جامد سیلیس دارند. این فرآیند اساساً شامل 4 مرحله است:
- لیز سلول ها:
نمونه های سلولی با “روش لیتیک” درمان می شوند که شامل شکستن غشای سلولی و حذف اسید نوکلئیک است.
- اتصال اسید نوکلئیک به غشای سیلیکاژل:
محلول اتصال (بافر + اتانول / ایزوپروپانول) به یک ستون اسپین منتقل می شود و سپس ستون در داخل یک سانتریفیوژ قرار می گیرد که به نوبه خود محلول اتصال را از طریق غشای سیلیکاژل که در داخل اسپین قرار دارد، وادار می کند. ستون با در نظر گرفتن بهینه pH و غلظت نمک محلول اتصال، اسید نوکلئیک تمایل به اتصال به غشای سیلیکاژل با عبور محلول از آن دارد.
- شستشوی اسید نوکلئیک متصل به غشاء سیلیکاژل:
در این مرحله جریان از بین رفته و یک بافر شستشو به ستون چرخش اضافه می شود. ستون چرخش دوباره در داخل سانتریفیوژ قرار می گیرد و بافر شستشو را مجبور به عبور از غشاء می کند. این امر حذف هرگونه ناخالصی باقیمانده از غشاء را تضمین می کند و فقط اسید نوکلئیک را به سیلیکا ژل متصل می کند.
- شستشوی اسید نوکلئیک:
سپس بافر شستشو جایگزین می شود و یک بافر شستشو (یا به سادگی آب) در ستون چرخش قرار می گیرد. ستون چرخش مجدداً در سانتریفیوژ قرار می گیرد و بافر شستشو را مجبور به عبور از غشاء می کند. بافر شستشو، اسید نوکلئیک را از غشای سیلیسی جدا می کند و اسید نوکلئیک از پایه ستون جمع آوری می شود.
ستونهای خالصسازی RNA وجود دارند که برای جداسازی و خالصسازی RNA از نمونه های بیولوژیکی مورد استفاده قرار میگیرند. این ستونها معمولاً از یک غشای سیلیکونی یا مواد مشابه ساخته شدهاند که به جذب RNA کمک میکنند.
روشهای مختلفی برای استخراج RNA وجود دارد، از جمله:
• روش استخراج بر اساس کلروفرم-فنل: این روش متداول برای استخراج RNA از بافت و سلول استفاده میشود و اساس اکثر کیت های استخراج مورد استفاده قرار میگیرد.
• تکنیک استخراج به روش ستون چرخشی: این تکنیک بر اساس غشای سیلیکا و ستونهای چرخشی برای خالصسازی RNA استفاده میشود.
• استفاده از ذرات مغناطیسی: این روش برای جداسازی RNA با استفاده از ذرات مغناطیسی که به RNA متصل میشوند و سپس با استفاده از یک میدان مغناطیسی جدا میگردند، به کار میرود.
این ستونها به دلیل دقت و خلوص بالایی که در جداسازی و خالصسازی RNA فراهم میکنند، در آزمایشگاههای مولکولی بسیار مورد استفاده قرار میگیرند و امکان تحقیقات دقیقتر و سریعتر را فراهم میآورند. این ستونها میتوانند برای استخراج RNA از نمونههای مختلف بیولوژیکی مانند خون، بافتها و مایعات بدن به کار روند.
ستون استخراج 8 لایه سبز
- ستون استخراج 8 لایه سبز یک نوع ستون استخراج اسید نوکلئیک (DNA یا RNA) است
- این ستون دارای 8 لایه فیلتر (سیلیکا) است.
- این ستون بسته 50 عددی حاوی 50 ستون و 50 کالکشن تیوب عرضه می شود.
- این ستون مناسب برای استخراج DNA/RNA و RNA High Pure است و
- دارای تاریخ انقضای بالا است.
کلام آخر:
رنگ رینگ ها در داخل ستون ها به صورت قراردادی بوده و ثابت نمی باشد. این رینگ در شرکت های مختلف متفاوت می باشد، اگر به دنبال مورد خاصی از ستون ها میباشید، باید در ویژگی های ستون های شرکت های مختلف جستجو کنید و نه به دنبال رنگ ها باشید. برای دریافت اطلاعات تخصصی میتوانید با کارشناسان ما در ماناتک تماس حاصل فرمایید.
نقد و بررسی‌ها
هنوز بررسی‌ای ثبت نشده است.