دوره آموزش آنالیز داده های Real-Time PCR
معرفی دوره
تکنیک Real-Time PCR (qPCR) یکی از حیاتیترین و حساسترین روشها در مطالعات بیان ژن است، اما استخراج نتایج دقیق و تحلیل درست دادههای خام آن همواره یکی از چالشهای اصلی پژوهشگران حوزه زیستشناسی مولکولی و پزشکی است. در این دوره آموزشی تخصصی، به صورت گامبهگام و با رویکردی کاملاً کاربردی، یاد خواهید گرفت که چگونه دادههای خام دستگاه را به نتایج علمی معتبر، مستند و آماده برای انتشار در مقالات بینالمللی تبدیل کنید. این دوره به گونهای طراحی شده است که شما را از فرمولهای پایه ریاضی تا پیچیدهترین سناریوهای آزمایشی و آزمونهای آماری همراهی کند.
در بخش نخست این دوره، به کالبدشکافی کامل روش متداول لیواک در سناریوهای مختلف تجربی میپردازیم. شما یاد میگیرید که چگونه محاسبات را در سادهترین حالت (یک کیس و یک کنترل بدون تکرار) آغاز کرده و سپس آن را در شرایط واقعیتر و پیچیدهتر بسط دهید؛ از جمله زمانی که نمونهها دارای چندین تکرار تکنیکال (Technical Replicates) هستند، یا زمانی که با نمونههای مستقل (Unpaired) و جفتشده (Paired) در قالب چندین کیس و کنترل سروکار دارید. علاوه بر این، در جلسات اول و دوم به یکی از کلیدیترین مفاهیم یعنی محاسبه کارایی یا افیشنسی (Efficiency) واکنش از طریق رسم منحنی استاندارد (Standard Curve) با استفاده از رقتهای متوالی میپردازیم تا پایه محاسبات شما کاملاً دقیق و بینقص باشد.
در ادامه مسیر و در جلسه دوم، متد فافل (Pfaffl Method) را به عنوان جایگزینی قدرتمند برای روش لیواک (به ویژه زمانی که کارایی واکنش ژن هدف و رفرنس برابر نیست) بررسی میکنیم. در این بخش، ضمن مقایسه دقیق مزایا و معایب هر دو متد، به شما آموزش داده میشود که بر اساس طراحی آزمایش خود، کدام روش مناسبتر است. همچنین برای اعتباربخشی به نتایج، نحوه انتخاب و اعمال آزمونهای آماری مناسب بر روی دادههای نهایی بیان ژن به طور کامل تشریح میشود تا بتوانید با اطمینان کامل در مورد معنادار بودن تغییرات بیان ژن اظهار نظر کنید.
در نهایت، در جلسه سوم دوره، وارد فاز پیشرفته و مدرن تحلیل دادهها خواهید شد. در این جلسه، کار با نرمافزار تخصصی LinRegPCR را یاد میگیرید؛ ابزاری قدرتمند که به شما امکان میدهد بدون نیاز به تهیه رقتهای متوالی و رسم منحنی استاندارد، کارایی (Efficiency) واکنش را مستقیماً از روی ساختار و شیب نمودارهای تکثیر (Amplification Curves) به دست آورید. این دوره، پکیجی جامع و بینظیر برای تمام محققانی است که میخواهند فرآیند آنالیز دادههای qPCR را یکبار برای همیشه، علمی، اصولی و بدون ابهام یاد بگیرند.
مدرس دوره: احسان کرامتی – دکترای تخصصی ژنتیک