سبد خرید شما
Fa   En

برای شما

پشتیبانی

تماس با پشتیبانی

شبکه های مجازی

  • اینستاگرام
  • تلگرام
  • ایتا

کالیبراسیون دستگاه step one plus

برای دستگاه real time pcr مدل StepOne Plus، کالیبراسیون شامل چند مرحله مهم است که به تضمین دقت نتایج آزمایش کمک می‌کند. کالیبراسیون باید به‌صورت دوره‌ای و با استفاده از استانداردهای معتبر انجام شود. مراحل کالیبراسیون شامل تنظیم دما، بررسی سیستم نوری و کالیبراسیون نرم‌افزار است. کالیبراسیون واکنش‌دهنده‌ها: کالیبراسیون واکنش‌دهنده‌ها برای تضمین دقت و صحت نتایج PCR ضروری است. واکنش‌دهنده‌ها باید در مقابل استانداردهای شناخته شده کالیبره شوند و نتایج باید به‌دقت مستندسازی شوند. بررسی سیستم نوری: بررسی‌های منظم سیستم نوری برای اطمینان از عدم وجود عیب یا ناهم‌راستایی‌ای که می‌تواند بر خوانش‌های فلورسانس تأثیر بگذارد، ضروری است. تأیید دما: تأیید دقت تنظیمات دمای سیکلر حرارتی با استفاده از یک دماسنج کالیبره شده برای اطمینان از دستیابی به دماهای دقیق در طی فرآیند PCR ضروری است. کالیبراسیون نرم‌افزار: به‌روزرسانی‌های منظم و کالیبراسیون نرم‌افزار تجزیه و تحلیل برای اطمینان از دقت تفسیر داده‌ها ضروری است.

مراحل کالیبراسیون

آماده‌سازی دستگاه: قبل از شروع کالیبراسیون، دستگاه باید تمیز و بدون هرگونه آلودگی باشد. صفحه کالیبراسیون باید در دمای اتاق برای مدت زمان مشخصی قرار گیرد تا به شرایط محیطی دستگاه عادت کند. ابتدا دستگاه را با استفاده از کابل سیستم StepOne به کامپیوتر متصل کنید. مطمئن شوید که کابل سیستم به پورت اترنت زرد دستگاه متصل شده و به پورت اترنت کامپیوتری که نرم‌افزار StepOne را اجرا می‌کند، وصل است.

کالیبراسیون پس‌زمینه (Background Calibration): این مرحله به منظور حذف نویز و سیگنال‌های ناخواسته ایجاد شده توسط دستگاه یا مواد مصرفی است. انجام این کالیبراسیون به دستگاه کمک می‌کند تا تنها سیگنال‌های معتبر ناشی از فلورسانس نمونه‌ها را شناسایی و تفسیر کند. این مرحله به منظور تعیین سطح فلورسانس پس‌زمینه برای هر چاهک است. پس‌زمینه فلورسانس می‌تواند به دلیل مواد شیمیایی موجود در واکنش یا ناخالصی‌های پلاستیکی وجود داشته باشد. کالیبراسیون پس‌زمینه به دستگاه کمک می‌کند تا سیگنال‌های واقعی را از نویز جدا کند.

بارگذاری صفحه کالیبراسیون: درب دستگاه را باز کنید. صفحه کالیبراسیون را در محفظه نمونه قرار دهید به طوری که موقعیت A1 در گوشه عقب-چپ باشد. درب دستگاه را به آرامی ببندید.

کالیبراسیون رنگ (Dye Calibration): برای تضمین اینکه دستگاه به درستی قادر به تشخیص و تفکیک طیف‌های مختلف رنگ‌های فلورسنت است، کالیبراسیون رنگ انجام می‌شود. این کار با استفاده از نمونه‌های استانداردی که دارای رنگ‌های فلورسنت مشخص هستند انجام می‌شود و نیاز به دقت بالا در تنظیمات نوری و الکترونیکی دستگاه دارد. این فرایند برای تنظیم تشخیص رنگ‌های فلورسانتی استفاده شده در آزمایش‌ها ضروری است. هر رنگ مشخصی که در واکنش‌های PCR استفاده می‌شود نیاز به تنظیم دقیق دارد تا اطمینان حاصل شود که دستگاه می‌تواند فلورسانس را به درستی تشخیص دهد. این کالیبراسیون به خصوص برای جلوگیری از تداخل بین رنگ‌ها و بهبود دقت تفسیر نتایج مهم است.

تایید کالیبراسیون: پس از اتمام فرایند کالیبراسیون، نتایج باید بررسی و تأیید شوند تا اطمینان حاصل شود که دستگاه در محدوده مشخصات فنی قرار دارد. این کار اغلب شامل اجرای یک آزمایش کنترلی با پارامترهای شناخته شده است تا دقت دستگاه تأیید شود.

 تکمیل کالیبراسیون:

اگر دستگاه کالیبراسیون را پاس کرده باشد، به مرحله بعدی بروید. در غیر این صورت، خطا را طبق دستورالعمل‌های ‘Dye Calibration Failure’ عیب‌یابی کنید. این دستورالعمل‌ها به شما کمک می‌کنند تا اطمینان حاصل کنید که دستگاه StepOne Plus به درستی کالیبره شده است و عملکرد صحیحی دارد. پوشیدن دستکش‌های بدون پودر در طول فرایند کالیبراسیون بسیار مهم است تا از آلودگی صفحات جلوگیری شود و دقت آزمایش حفظ گردد. همچنین، مراقب باشید که صفحه کالیبراسیون تمیز باقی بماند و هیچ مایع یا آلودگی دیگری به پایه نمونه‌ها نچسبد، زیرا این امر می‌تواند سیگنال پس‌زمینه غیرطبیعی بالایی ایجاد کند و به دقت تجزیه و تحلیل آسیب بزند.

 

 

بیشتر بخوانید:کالیبراسیون دستگاه quantstudio 5

***برای خرید د ستگاه کلیک کنید***

 RNase P

آزمایش RNase P یکی از موارد مهم در کالیبراسیون و تایید عملکرد دستگاه‌های PCR زمان واقعی مانند دستگاه‌های تولیدی شرکت Applied Biosystems (ABI) است. این آزمایش برای ارزیابی دقت و عملکرد کلی دستگاه قبل از شروع به کار تجزیه و تحلیل نمونه‌های مهم و حساس استفاده می‌شود. RNase P یک آنزیم طبیعی است که در همه سلول‌های زنده یافت می‌شود و نقش آن در پردازش RNA‌های پیش‌ساز مولکولی مهم است. در زمینه PCR زمان واقعی، استفاده از RNase P به عنوان یک نشانگر کنترل داخلی عمل می‌کند تا از حضور DNA نوکلئیک انسانی در نمونه اطمینان حاصل شود و به عنوان یک معیار برای تایید عملکرد صحیح دستگاه PCR زمان واقعی استفاده می‌شود.

کالیبراسیون RNase P

این مرحله شامل استفاده از یک نمونه کنترل استاندارد معروف به RNase P برای تنظیم دستگاه است. RNase P به عنوان یک نمونه مثبت کنترل استفاده می‌شود و به دستگاه کمک می‌کند تا توانایی تشخیص و تفسیر دقیق فلورسانس را تعیین کند. این مرحله برای اطمینان از کارکرد صحیح دستگاه در طول آزمایش‌های واقعی بسیار مهم است. هر یک از این مراحل کالیبراسیون به طور خاص به منظور بهینه‌سازی کارایی دستگاه و دقت نتایج طراحی شده‌اند. انجام دقیق این کالیبراسیون‌ها برای اطمینان از صحت و اعتبار نتایج آزمایش‌های PCR ضروری است.

زمان استفاده از کالیبراسیون RNase P

استفاده از کالیبراسیون RNase P به طور معمول بر اساس نیاز و شرایط خاص آزمایش انجام می‌شود. این کالیبراسیون همیشه لازم نیست و بیشتر در مواقعی که نیاز به تایید دقت بالای دستگاه است یا وقتی که نمونه‌های بسیار حساس و مهمی در حال تست هستند، انجام می‌شود. در واقع، این کالیبراسیون به عنوان بخشی از روتین معمول کالیبراسیون ممکن است در برخی پروتکل‌ها در نظر گرفته نشود، مگر اینکه خصوصاً لازم باشد.

آزمایش RNase P معمولاً در موارد زیر انجام می‌شود:

  • قبل از شروع یک سری جدید تجزیه و تحلیل‌ها برای تایید عملکرد دستگاه.
  • پس از نصب دستگاه جدید یا انجام تعمیرات یا تغییراتی بر روی دستگاه موجود.
  • در زمان‌هایی که شک و شبهه‌ای در مورد دقت دستگاه وجود دارد یا نتایج غیرمنتظره‌ای به دست می‌آید.

کاربرد آزمایش RNase P

آزمایش RNase P بیشتر به عنوان یک تست کنترل کیفیت برای تایید صحت نتایج داده‌های PCR استفاده می‌شود. این آزمایش به خصوص مهم است زیرا:

  • تایید می‌کند که DNA مورد نظر به درستی از نمونه استخراج شده است.
  • اطمینان می‌دهد که دستگاه PCR به درستی تنظیم شده و عملکرد مناسبی دارد.
  • کمک می‌کند تا اطمینان حاصل شود که واکنش‌های آنزیمی و فلورسنت در طول PCR به طور موثر صورت می‌گیرند.

کلام آخر

این آزمایش به عنوان بخشی از پروتکل استاندارد روتین در آزمایشگاه‌های استفاده‌کننده از تجهیزات ریل تایم PCR  محسوب می‌شود و نقش مهمی در تضمین کیفیت و صحت نتایج آزمایشگاهی ایفا می‌کند. جهت انجام کالیبراسیون دستگاه های خود فرم بالا را پر کرده و منتظر تماس همکاران ما باشید و یا با کارشناسان ما در ماناتک تماس حاصل فرمایید.

0 0 رای ها
امتیازدهی به مقاله
اشتراک در
اطلاع از
guest
0 نظرات
بازخورد (Feedback) های اینلاین
مشاهده همه دیدگاه ها
Fa En
لطفاً برای تکمیل این فرم، جاوا اسکریپت را در مرورگر خود فعال کنید.
Click or drag a file to this area to upload.
در صورت لزوم تصویری از دستگاه را ارسال کنید.