OTV چیست؟
Optical Temperature Verification (OTV) یک روش است که برای تأیید دمای داخل چاهک ها در دستگاه Rotor-Gene Q استفاده میشود، کالیبراسیون دمای داخل چاهک ها به عنوان یک الزام آزمایشگاهی در نظر گرفته میشود. روش OTV به کاربران امکان میدهد تا این الزامات را رعایت کنند، حتی اگر فواصل کالیبراسیون خاصی برای محل مورد نظر وجود داشته باشد. OTV با استفاده از کیت Rotor-Disc OTV انجام میشود. روش OTV: این روش به وسیله یک کیت خاص به نام Rotor-Disc OTV Kit انجام میشود که به کاربران اجازه میدهد دمای داخل لولهها را در دستگاههای Rotor-Gene Q بررسی کنند.
کاربرد OTV: این روش برای تأیید دقت دمایی در آزمایشهای مختلف زیستمحیطی که نیازمند دقت بالا در کنترل دما هستند، استفاده میشود.
چرا OTV مهم است؟ در بسیاری از آزمایشهای پزشکی و تحقیقاتی، دقت دمایی حیاتی است. OTV به آزمایشگاهها این امکان را میدهد که دمای محیطهای آزمایشی خود را به طور دقیق تأیید کنند تا اطمینان حاصل شود که نتایج آزمایشات تحت تأثیر خطاهای دمایی قرار نگیرند.
کاربرد OTV
OTV از خواص نوری سه کریستال مایع ترموکرومیک (TLC) به عنوان مراجع دمای مطلق استفاده میکند. هنگامی که گرم میشوند، TLCها از حالت کدر به شفاف در دماهای بسیار دقیق (۵۰°C، ۷۵°C، و ۹۰°C) تغییر میکنند. خود TLCها فلورسنس ندارند. بنابراین، لازم است که منبع تحریک با یک درجه فلورسنت پوشانده شود تا نقاط انتقال TLC توسط سیستم نوری Rotor-Gene Q MDx قابل تشخیص باشند. TLCهایی که زیر دمای انتقالشان هستند کدر بوده و نور را منعکس میکنند.
برخی از نور منعکس شده به سمت دتکتور پراکنده میشود، که موجب افزایش فلورسنس میشود. وقتی دمای داخل لوله به نقطه انتقال TLC میرسد، TLC شفاف میشود و نور از طریق نمونه عبور میکند به جای اینکه به سمت دتکتور منعکس شود، که نتیجه آن کاهش فلورسنس است. تغییر در فلورسنس برای تعیین دمای انتقال دقیق هر TLC استفاده میشود. دمای انتقال با دمایی که در فایل کالیبراسیون کارخانه برای دیسک OTV Rotor-Disc گزارش شده است مقایسه میشود تا بررسی شود که آیا دستگاه Rotor-Gene Q در محدوده مشخصات دمایی قرار دارد یا خیر.
مؤلفههای کیت Rotor-Disc OTV
کیت Rotor-Disc OTV که شامل موارد زیر است:
1- روتور Rotor-Disc 72 OTV مهر و موم شده (شامل TLCها)
2- قرارگیری صفحه پراکندهکننده فلورسنت در برخی مدل ها
3- یک CD که شامل فایلهای زیر است:
فایل OTV با شماره سریال (.otv)؛ قالب تست OTV (.ret)؛ دفترچه راهنمای OTV (.pdf)؛ گواهینامه انطباق (.pdf)؛ اجرای مرجع OTV (*.rex) برگه محصول
4- روتور Rotor-Disc 72
بیشتر بخوانید:کالیبراسیون دستگاه های PCR
5- حلقه قفل کننده Rotor-Disc 72
محتویات کیت
- OTV Rotor-Disc حاوی کریستالهای مایع ترموکروماتیک
- درجهای فلورسنت مخصوص مدلهای مختلف Rotor-Gene
- CD شامل فایلهای کالیبراسیون و دستورالعملها
نحوه نگهداری
- OTV Rotor-Disc باید در محیط تاریک و خشک و دور از نور مستقیم نگهداری شود.
- از قرار دادن درجهای فلورسنت در معرض نور UV یا نور قوی دیداری اجتناب شود.
فرآیند کالیبراسیون
قرار دادن فلورسنت: بر اساس مدل دستگاه Rotor-Gene، فلورسنت مناسب روی عدسی تحریک در پایین محفظه دستگاه قرار داده میشود.
نصب OTV Rotor-Disc: این دیسک داخل Rotor-Disc 72 Rotor قرار گرفته و با استفاده از Rotor-Disc 72 Locking Ring محکم میشود.
اجرای برنامه کالیبراسیون: از طریق نرمافزار Rotor-Gene، فرآیند کالیبراسیون با وارد کردن شماره سریال OTV Rotor-Disc شروع میشود.
تحلیل نتایج: پس از اتمام برنامه، نرمافزار نشان میدهد که آیا دستگاه ضمن مشخصات فنی قرار دارد یا نیاز به تنظیم مجدد دارد.
تضمین کیفیت
- هر لات از کیتهای Rotor-Disc OTV با مشخصات معینی آزمایش میشود تا اطمینان حاصل شود که محصول با کیفیت برابر و قابل اعتماد است.
کالیبراسیون کانالهای رنگی دستگاه Rotor-Gene
کالیبراسیون کانالهای رنگی دستگاه Rotor-Gene برای اطمینان از دقت و حساسیت شناسایی فلورسانس در هر کانال نوری ضروری است. این فرآیند شامل تطبیق طول موجهای نوری، بررسی حساسیت کانالها برای شناسایی رنگهای فلورسانس مختلف (مانند FAM، VIC، ROX، Cy5، و غیره) و حذف تداخل بین کانالها است. مراحل کالیبراسیون به شرح زیر است:
- انتخاب مواد مرجع فلورسانس (Dye Calibration Standards):
مواد مرجع شامل رنگهای فلورسانسی استاندارد برای هر کانال نوری هستند که توسط سازنده دستگاه یا شرکتهای تولیدکننده کیتهای مربوطه ارائه میشوند. این مواد باید خالص بوده و غلظت مشخصی داشته باشند. - تنظیم دستگاه برای کالیبراسیون:
ابتدا نمونههای حاوی مواد مرجع فلورسانس را در تیوبهای Rotor-Gene قرار دهید. در صورت امکان از روتور خاصی که برای کالیبراسیون پیشنهاد شده است استفاده کنید (معمولاً روتور 36 یا 72 نمونه). سپس اطمینان حاصل کنید که درپوشها محکم بسته شده باشند تا از نشت نور جلوگیری شود. - اجرای کالیبراسیون در نرمافزار:
نرمافزار دستگاه Rotor-Gene شامل گزینهای برای کالیبراسیون رنگ است. وارد منوی تنظیمات کالیبراسیون شوید و نوع رنگهایی که قصد کالیبر کردن دارید (مانند FAM، VIC، ROX، Cy5) را انتخاب کنید. هر کانال رنگی باید جداگانه کالیبر شود. - ثبت سیگنالهای فلورسانس:
دستگاه شروع به شناسایی و ثبت شدت سیگنال فلورسانس از مواد مرجع در هر کانال رنگی میکند. این مرحله برای تعیین حساسیت دستگاه در شناسایی فلورسانس در طول موجهای خاص انجام میشود. اگر سیگنال ضعیف باشد، ممکن است تنظیماتی مانند شدت نور یا حساسیت تشخیص نیاز به تغییر داشته باشد. - تأیید همترازی کانالها:
نرمافزار دستگاه به طور خودکار بررسی میکند که آیا سیگنالهای ثبتشده در هر کانال با محدوده قابل قبول مطابقت دارند یا خیر. اگر کانالی نیاز به تنظیمات بیشتری داشته باشد، پیامهای راهنما در نرمافزار نمایش داده میشوند. - حذف تداخلات (Cross-Talk Calibration):
یکی از مهمترین مراحل کالیبراسیون کانالهای رنگی، حذف تداخل بین کانالها است. این فرآیند تضمین میکند که سیگنال یک رنگ خاص بهطور تصادفی توسط کانال دیگری شناسایی نشود. دستگاه بهطور خودکار این مرحله را انجام میدهد و تنظیمات لازم را اعمال میکند. - ذخیره تنظیمات کالیبراسیون:
پس از اتمام فرآیند، تنظیمات جدید بهعنوان پروفایل کالیبراسیون ذخیره میشوند. این پروفایل برای آزمایشهای بعدی استفاده میشود و اطمینان میدهد که دادههای فلورسانس به درستی تفسیر میشوند. - بررسی با کنترل مثبت و منفی:
برای تأیید صحت کالیبراسیون، آزمایش با استفاده از کنترلهای مثبت و منفی برای هر کانال رنگی انجام دهید. نتایج باید با مقادیر مورد انتظار مطابقت داشته باشند.
کلام آخر
با مطالعه این مقاله دریافتیم که، با انجام کالیبراسیون های دوره ای به صورت منظم، دقت و صحت نتایج آزمایشهای خود را تضمین کنید و از عملکرد بهینه دستگاه Rotor-Gene بهرهمند شوید. جهت انجام کالیبراسیون دستگاه های ریل تایم خود با کارشناسان ما در ماناتک در تماس باشید و فرم مورد نظر را پر نمایید، همکاران ما در اسرع وقت با شما تماس خواهند گرفت.